紫外可見分光光度計的應(yīng)用--用多組分分析法對各組分定量
在一個波長下,溶液的總吸光度等于每種成分的吸光度之和?;诖耍梢苑治龌旌衔锏母鱾€組分。
如果有混合物,雖然是多組分,但組分吸收帶不重疊。一個成分在某個波長有很大的吸收,而其他成分在這個波長沒有吸收。這樣,上述標準曲線法就可以用于該波長下該組分的定量測定。
如果是多組分混合物,雖然吸收帶相互重疊,但符合比爾定律,則可以采用不相交議程的方法進行量化。如果混合物包含 n 個已知成分,則需要在 n 個合適的波長下測量 n 個子成分在 n 個波長下的摩爾吸收系數(shù)。在選擇波長時,應(yīng)注意使一種成分的吸收系數(shù)大于其他成分的吸收系數(shù),以獲得更高的精度。
如果混合物中幾種成分的吸收帶相互重疊,并且不符合比爾定律,則無法通過求解聯(lián)立方程進行分析。此時,很難通過分光光度法進行量化。 Fry 使用校準方法將混合樣品中的五組分成不同的溶液,從而獲得一系列校準曲線。在校準曲線的基礎(chǔ)上,通過分析得到五種組分的含量。但該方法非常繁瑣,使用不方便。
如果混合物中含有未知吸收帶的成分,則難度更大。這時候最好先用化學分離提純。但也可以直接用分光光度法分析。使用雜質(zhì)存在時吸收光譜形狀的變化,計算混合物中含有雜質(zhì)時的魚肝油量。分光光度法雖然可用于多組分分析,但方法相對繁瑣。
近年來,許多分光光度計都配備了多組分分析附件。借助微處理器對混合物中多種成分的含量進行分析和計算非常簡單、快速和準確。使分光光度法在混合定量分析中發(fā)揮更大的作用。同樣,后面介紹的導數(shù)光譜也可以用來量化。
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